- Để khảo sát khả năng tổng hợp cellulase của B. subtilis trong môi trường chứa bã đậu nành, chúng tôi tiến hành thay thế toàn bộ CMC trong môi trường nuôi cấy ở mục 3.4 lần lượt bằng bã đậu nành với hàm lượng khác nhau 1%, 3%, 5% đồng thời đặc thêm mẫu môi trường có chứa CMC để so sánh.
Quá trình nuôi để thu enzyme được tiến hành ở 370C, lắc 120 rpm/ phút trong 48 giờ. Dịch sau khi nuôi cấy được ly tâm 5000rpm/phút trong 15 phút để loại bỏ bã và xác tế bào vi khuẩn sau đó tiến hành xác định hoạt lực của các enzyme thu được.
- Xác định hoạt lực cellulase bằng cách đo đường kính vòng thủy phân:
Để khảo sát khả năng tổng hợp cellulase ngoại bào từ môi trường chứa bã đậu nành, chúng tôi tiến hành cho lần lượt các enzyme với một lượng bằng nhau vào các lỗ nhỏ đã khoét trên đĩa thạch chứa cơ chất là CMC với nồng độ0,5%, ủ ở 400C trong thời gian 24 giờ.
Ở môi trường nuôi cấy chứa CMC, vòng thủy phân enzyme trên thạch là nhỏ nhất 9 (mm). Ở môi trường nuôi cấy chứa 3% bã đậu nành thì vòng thủy phân enzyme trên thạch là lớn nhất 17 (mm), điều đó cho thấy hàm lượng enzyme sinh ra sau khi nuôi cấy trong môi trường này là nhiều nhất. Qua kết quả khảo sát, chúng tôi rút ra rằng việc nuôi cấy vi khuẩn Bacillus subtilis trong môi trường chứa 3% bã đậu nành thích hợp để thu nhận cellulase phục vụ cho quá trình thủy phân. Hơn nữa, bã đậu nành làm chất kích ứng nuôi cấy sẽ thu được enzyme cellulase có tính đặc hiệu trong việc thủy phân cellulose của bã đậu nành.
» Tin mới nhất:
» Các tin khác: